文题释义:
MiRNAs:是长度为22个核苷酸的短RNA序列,通过与mRNA的3’-非翻译区互补结合负调控靶基因,调控多种细胞生物学进程,如增殖、分化、细胞生长、发育和死亡。一个miRNA可以靶向数百个mRNA并影响多种基因的表达。
Runx2:是Runx家族中的一员,它们具有共同的DNA结合域Runt,由Runx1、Runx2和Runx3组成,在骨骼发育中起到关键作用。由于Runx2mRNA序列编码特异性蛋白质结构,Runx2被认为是骨形成和骨重塑的重要转录因子。
背景:研究表明miR-889-3p可参与调控多种细胞的增殖分化过程,但是其对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响尚不明确。
目的:探讨miR-889-3p对脂肪间充质干细胞成骨分化的调节作用。
方法:体外分离、培养SD大鼠脂肪间充质干细胞,转染miR-889-3p模拟物(miR-889-3pmimic)、miR-889-3p抑制剂(miR-889-3pinhibitor)和阴性对照(miR-NC)并诱导成骨分化。RT-PCR和Westernblot检测成骨诱导14d后的碱性磷酸酶活性、Runx2、骨钙素、骨桥素、Osterix等成骨相关mRNA和蛋白的表达。将野生型Runx2、突变型Runx2分别与miR-889-3p模拟物和miR-NC共转染脂肪间充质干细胞,通过双荧光素酶报告基因检测miR-889-3p与Runx2的靶向关系。
结果与结论:①miR-889-3p表达水平随成骨诱导时间延长而逐渐减低;②成骨诱导第7天和第14天miR-889-3pinhibitor组的矿化结节数目、大小、颜色深浅明显超过miR-889-3pmimic组和miR-NC组();③miR-889-3p过表达后,碱性磷酸酶活性、Runx2、骨钙素、骨桥素、OsterixmRNA及蛋白表达量显著降低,而miR-889-3p敲除后成骨相关mRNA和蛋白表达量明显提高;④双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-889-3p过表达显著降低了野生型Runx2的荧光素酶活性;⑤上述结果表明,miR-889-3p通过靶向Runx2负向调控脂肪间充质干细胞成骨分化。
(张耀天)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程
关键词:miR-889-3p,Runx2,脂肪间充质干细胞,成骨分化,骨缺损
引用本文:张耀天,崔军,刘晶毅.miR-889-3p靶向Runx2抑制脂肪间充质干细胞的成骨分化[J].中国组织工程研究,2023,27(19):3023-3028.
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miR-889-3p靶向Runx2抑制脂肪间充质干细胞的成骨分化























